Mecanismo de resistencia a antibióticos glicopeptidicos y aminoglucosidos en enterococcus.

Resumen

En esta tesis se ha estudiado la diseminación de los genes de resistencia a glicopéptidos en cepas de Enterococcus de diferente origen (clínico, ambiental y animal) y en grupos taxonómicos relacionados. Asimismo se ha determinado los métodos de detección fenotípica y genotípica de la resistencia a glicopéptidos y aminoglucósidos en dichas cepas y se ha valorado la actividad bactericida sinérgica de diferentes combinaciones de antibióticos en cepas de Enterococcus con diferentes mecanismos de resistencia. Se ha detectado resistencia de alto nivel (RAN) a glicopéptidos en cepas de Enterococcus de diferentes orígenes: aguas residuales (29%), intestinos de pollo (298%), heces de pacientes hospitalizados (15%) y alimentos. La RAN a glicopéptidos en estas cepas fue inducible por concentraciones subinhibitorias de vancomicina y teicoplanina, evidenciándose la presencia de la proteína VanA de 39 kDa en los extractos proteícos inducidos. En todos los casos se transfirió la resistencia a vancomicina por conjugación cuando se utilizó E. faecalis JH22 como receptor y en casi todos los casos se cotransfirió la resistencia a eritromicina. La transferencia coincidió con la adquisición de un plásmido de elevado peso molecular aunque la hibridación se produjo a nivel del cromosoma. Todas las cepas fueron caracterizadas en el genotipo vanA y en todas ellas se detectó por PCR la presencia de los genes del operón vanA (vanA, vanR, vanS, vanH, vanX, vanZ, vanY). Estos genes no fueron detectados en bacterias lácticas con resistencia a glicopeptidos a excepción del gen vanR en 2 cepas de Pediococcus pentosaceus (97% homología con vanR de Enterococcus). Se detectaron las enzimas modificantes de aminoglucósidos en las cepas de Enterococcus del estudio por PCR, hibridación y ensayo radioenzimático. Cabe destacar la detección de una nueva actividad enzimática AAC(6') en E. durans (especie específica ?), similar a l