Estudio de un sistema de marcadores microsatélites para la protección y defensa legal de variedades de vid ("Vitis vinifera L.")

Resumen

En esta tesis doctoral han sido analizadas alrededor de 5.000 plantas para evaluar un sistema de 9 microsatélites, tanto en la protección (incluyendo exámenes DHE-Distinción, Homogeneidad y Estabilidad), como en la defensa legal (incluyendo estudios de Identificación y establecimiento de la derivación esencial) de variedades pertenecientes a la especia Vitis vinífera L. Los 9 marcadores microsatélites seleccionados son: ZAG29, ZAG62, ZAG67, ZAG83, ZAG112, VVMD5, VVMD27, VVMD28 y VVS2. La optimación del sistema de genotipado incluyó el diseño de una PCR múltiple, electroforesis capilar y análisis de fluorescencia en un analizador genético. En relación con los exámenes DHE, el análisis de más de 1000 accesiones ha permitido establecer la distancia mínima para establecer la Distinción en 2 alelos. La Homogeneidad y Estabilidad han sido demostradas mediante el estudio de casi 3.700 plantas de 19 variedades distintas de vid. En el análisis de identificación, se ha establecido la significación del análisis molecular con un análisis matemático de la coincidencia, evaluando asimismo la influencia de estructura genética en la colección de 495 genotipos usada como referencia. Este análisis es igualmente válido para el establecimiento de la derivación esencial. En esta tesis se ha elaborado una propuesta de utilización del sistema y toma de decisiones tanto para la protección como para la defensa legal de variedades de vid. Además de forma análoga a la OIV, se han elaborado nuevos descriptores microsatélite para los 5 loci para los que no existían previamente.